臭氧發(fā)生器在食用菌行業(yè)的運(yùn)用：

食用菌各環(huán)節(jié)使用臭氧配比方式：

接種室 1g配2立方 最高級(jí)百級(jí)

其他的 1g配10立方 十萬(wàn)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

只用這兩種配比就可以了

就是說除了接種室，其他如凈化室都是1g配10立方

食用菌的車間

分為無(wú)菌接種室這是最高級(jí)別的

其次是菌瓶室，放食用菌瓶子的房間。這個(gè)要求其次，有條件可以按照1g配5立方的萬(wàn)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)來(lái)。

排框室，二次更衣室，更衣室，裝車室，凈化預(yù)冷車間可以按照1g配10g的十萬(wàn)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)走。

合作過的部分客戶：

臭氧對(duì)細(xì)菌、霉菌、病菌等微生物具有極強(qiáng)的殺滅力。它殺滅病毒是通地直接破壞其RNA和NDA物質(zhì)業(yè)完成的；而殺來(lái)細(xì)菌、老菌類微生物的過程則是臭氧首先作用于細(xì)薄臘，繼而破壞臘內(nèi)組織直至溶解死亡。臭氧在食用菌栽培中的殺菌應(yīng)用如下：

1.菌菇滅菌房在50立方米-100平方米的室內(nèi)，搭成多層菌菇架，做好植菇前準(zhǔn)備工作。然后在室內(nèi)較高處（離天花板20厘米-30厘米）安裝1臺(tái)壁掛式臭氧發(fā)生器，關(guān)好門、窗，開機(jī)1小時(shí)，即可達(dá)95%以上滅菌效果。

2.培養(yǎng)基處理，培養(yǎng)基按原配方要求配好，攤晾在室內(nèi)擱層架上，一切準(zhǔn)備好后，開機(jī)1小時(shí)，即可95%以上滅菌效果。臭氧是氣體具有彌撒性，可以擴(kuò)散到任意角落，對(duì)任何角落進(jìn)行消毒，沒有死角。

3.將接好的菌種移入菌菇房?jī)?nèi)，開機(jī)滅菌30分鐘，然后關(guān)機(jī)，每天觀察食用菌生長(zhǎng)情況。為確保菌種生長(zhǎng)的良好環(huán)境，每次觀察，可開機(jī)15分鐘，停機(jī)后密封，防止腐殖菌、雜菌滋生，促進(jìn)食用菌健康生長(zhǎng)。為方便操作，可將臭氧機(jī)的電源開關(guān)安裝在菌菇房門外方便使用。入室操作后即閉門開機(jī)，定時(shí)關(guān)機(jī)。

4.食用菌在我國(guó)被稱為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的第四大產(chǎn)業(yè)。是繼糧食，生豬，瓜果之后又一快速發(fā)展農(nóng)業(yè)品種。食用菌生產(chǎn)的成敗，產(chǎn)量高底，質(zhì)量的優(yōu)劣，直接取決于生產(chǎn)制作過程中的每個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。

5.根據(jù)生產(chǎn)環(huán)節(jié)KPI分析，可分為六大關(guān)鍵環(huán)節(jié)。1、培養(yǎng)料配置 ；2、消毒環(huán)節(jié) ；3、優(yōu)質(zhì)菌種選擇及接種 ；4、發(fā)菌培養(yǎng) ；5、出菇棚場(chǎng)地建立和出菇 ；6、食用菌采收和臭氧保鮮 。

6.每個(gè)環(huán)節(jié)都需嚴(yán)格把關(guān)，以減少雜菌污染和病蟲鼠害，育壯菇體，增強(qiáng)自身抗病抵害能力，才能提高成品率，降低成本。

最新臭氧技術(shù)，可以提高食品菌質(zhì)量，避免霉變。提高食品菌產(chǎn)量20%以上。

一、培養(yǎng)料配置

培養(yǎng)料主要以樺木料的木屑為最好，配以棉子殼、黃豆桿、玉米芯等。輔以麥麩皮、米糠、添加微量元素。原材料新鮮、干燥、無(wú)霉?fàn)€變質(zhì)是成功的基礎(chǔ)。

培養(yǎng)料的配制先按比例將所需原料(木屑、麥麩皮、石膏)干料充分混合拌均，添加的微量元素倒入水中化開后加入料中，反復(fù)攪拌多次，使料干濕均勻，成團(tuán)料要打散開。

二、消毒環(huán)節(jié)

采用臭氧技術(shù)對(duì)食用菌生產(chǎn)環(huán)節(jié)進(jìn)行滅菌消毒，可以在常溫下處理，降低能耗，替代高溫滅菌柜。

培養(yǎng)料消毒:是食用菌培養(yǎng)最關(guān)鍵環(huán)節(jié)。配制好的培養(yǎng)料采用高濃度臭氧水機(jī)生產(chǎn)的10mg/L臭氧水浸泡1小時(shí)。

培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)袋消毒：采用10mg/L高濃度臭氧水浸泡30分鐘。

接種室消毒：接種室在培養(yǎng)前三天采用臭氧機(jī)對(duì)空氣強(qiáng)化消毒。臭氧消毒濃度為20-30mg/M3.

滅菌徹底是提高成品率、降低成本、提高效益的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。培養(yǎng)料采用臭氧水浸泡。可以保證培養(yǎng)料衛(wèi)生、殺死培養(yǎng)料中的霉菌等。靈活掌握培養(yǎng)料的含水量，根據(jù)木屑質(zhì)地軟硬、粗細(xì)、含水量、空氣濕度的大小等，配比的含水量予以相應(yīng)調(diào)整。一般含水量達(dá)55-60%即可。培養(yǎng)料的含水量直接影響菌絲的正常生長(zhǎng)，含水量過低菌絲生活力降低，含水量過高則降低菌絲的呼吸強(qiáng)度，影響菌絲的正常生長(zhǎng)。

三、優(yōu)質(zhì)菌種選擇及接種

選擇適宜本地生長(zhǎng)的優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、高抗的優(yōu)良菌株，嚴(yán)禁使用有雜質(zhì)菌污染和蟲害跡象以及退化、老化的劣質(zhì)菌種。嚴(yán)格接種程序，確保接種成功率。接種室要求干凈、干燥、密閉、遠(yuǎn)離污染源。滅好的菌袋或菌瓶進(jìn)入接種室內(nèi)。接種室內(nèi)事先應(yīng)經(jīng)過臭氧消毒。接種工具、接種人員的雙手要用75％酒精消毒。接種要迅速準(zhǔn)確，接種量不宜太小。

四、發(fā)菌培養(yǎng)

接種后的菌袋或菌瓶放入培養(yǎng)室內(nèi)，調(diào)控好環(huán)境溫度，培養(yǎng)室要求干凈、通氣、干燥，室溫宜控制在20－25℃左右，相對(duì)濕度70％左右（視品種而定）。當(dāng)菌絲長(zhǎng)到5－10cm左右即可翻袋檢查，及時(shí)淘汰污染袋，調(diào)整菌袋位置以利換氣通風(fēng)，當(dāng)菌絲長(zhǎng)到一半時(shí)，再翻袋檢查一次。整個(gè)發(fā)菌培養(yǎng)階段不需要光照。

發(fā)菌培養(yǎng)室內(nèi)每天采用臭氧氣體對(duì)培養(yǎng)室消毒1小時(shí)即可。

五、出菇棚場(chǎng)地建立和出菇

出菇棚要選擇在近河流、空氣流暢、四周寬闊、遠(yuǎn)離禽畜養(yǎng)殖場(chǎng)、釀造廠、生活區(qū)、醫(yī)院、垃圾場(chǎng)的地方。

臭氧處理出菇棚：對(duì)出菇場(chǎng)采取臭氧水澆灌，翻土、曬土、灌水等措施?？梢杂贸粞跛耆〈r(nóng)藥消毒，避免農(nóng)藥污染。水源水質(zhì)要求清潔的井水、自來(lái)水，應(yīng)遠(yuǎn)離污染水源，并經(jīng)過臭氧處理。

菇棚要求棚體牢固、地勢(shì)較高、排水暢通，棚內(nèi)不積水，覆蓋塑料薄膜和遮陽(yáng)網(wǎng)，防日曬雨淋。覆蓋物要厚一點(diǎn)，利于保溫，四周用草簾圍住，留通風(fēng)孔。

菌袋或菌瓶經(jīng)過數(shù)月的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)后，轉(zhuǎn)入生殖生長(zhǎng)，菌絲扭結(jié)、瘤狀突起，達(dá)到生理成熟，就要搬出發(fā)菌室進(jìn)入出菇棚，由于受環(huán)境條件、栽培時(shí)間、發(fā)菌溫度、品種等不同因素的影響，出菇時(shí)間也不相同，棚溫要在適宜的生長(zhǎng)溫度范圍內(nèi)才能出菇。

入棚時(shí)間一般選擇在晴天早晚進(jìn)行，中午溫度高不宜，高溫使菌皮損傷，推遲或減少出菇，切不可雨天入棚，雨淋會(huì)使菌袋表層污染而爛袋。菌袋上架每層并列排放，袋與袋之間間隔5－6cm，以利于呼吸和散熱，要營(yíng)造出菇的環(huán)境條件才能保證順利出菇。

六、食用菌采收和臭氧保鮮

適時(shí)采收銷售，采收過早影響產(chǎn)量，過遲影響質(zhì)量和價(jià)格。適時(shí)采收是保證質(zhì)量的先決條件，當(dāng)子實(shí)體長(zhǎng)到菌蓋尚未展開、邊緣仍向內(nèi)卷曲、肉質(zhì)肥厚、香味濃郁時(shí)質(zhì)量最佳，就應(yīng)及時(shí)采收。

食用菌采收后，應(yīng)放置在經(jīng)過臭氧消毒的庫(kù)房。經(jīng)過臭氧消毒的庫(kù)房，可以對(duì)食用菌保鮮，延長(zhǎng)食用菌保鮮周期。

平菇、草菇、杏鮑菇、蘑菇、金針菇用臭氧比較多

食用菌行業(yè)應(yīng)用：

接種室、種菌培養(yǎng)室消毒滅菌

凈化消毒殺菌營(yíng)造潔凈空間

工具、器皿、接種箱、周轉(zhuǎn)箱清洗殺菌

用高濃度臭氧水清洗殺菌

培養(yǎng)大棚用臭氧無(wú)菌水噴灑加濕

防止大棚培養(yǎng)過程中細(xì)菌病毒感染

用無(wú)菌臭氧水浸泡成品鮮菌

延長(zhǎng)保質(zhì)期

用無(wú)菌臭氧水浸泡成品鮮菌

食用菌在我國(guó)被稱為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的第四大產(chǎn)業(yè)。是繼糧食，生豬，瓜果之后又一快速發(fā)展農(nóng)業(yè)品種。臭氧是一種氣體強(qiáng)氧化劑，具有殺菌力強(qiáng)，不產(chǎn)生任何殘留污染，可直接對(duì)食用菌物料，接菌工具，接菌，菌房培養(yǎng)，大棚催芽使用的優(yōu)點(diǎn)。

　　一、在食用菌中的應(yīng)用

　?。?、用于食用菌接種室和接種箱能快速殺滅病毒及雜菌，菌種成活率達(dá)９８％以上。

　?。?、用于菌種培育室，每天將一定濃度的臭氧排入培育室，可消毒室內(nèi)雜菌，降低感染，可使菌種生產(chǎn)加快。

　?。?、用于食用菌生產(chǎn)棚，使在棚時(shí)內(nèi)注入臭氧或安排臭氧裝置，可簡(jiǎn)化工作程序，使菌類達(dá)到綠色食品標(biāo)準(zhǔn)，用臭氧水噴灑效果更佳。

　　４、用于食用菌加工、生產(chǎn)，將所需加工的物品放入臭氧水中清洗即可除去細(xì)菌病毒，降解了殘留在物品表面上的農(nóng)藥。

　　５、用于菌棚并保持一定的臭氧釋放頻率，可明顯提高出菇率，而且菇型美觀，商品化程度高。

　?。丁⒂糜谑秤镁ｕr，在保鮮室加入一定程度的臭氧，保鮮度比之前保鮮提高３－１０倍，從而贏得了更多時(shí)間，更高質(zhì)量，更好地把握市場(chǎng)的契機(jī)。

一，食用菌培養(yǎng)室與制菌工具的消毒滅菌
在食用菌廠，臭氧氣體用于食用菌培養(yǎng)室，接菌室食用菌培養(yǎng)室，接菌室與制菌工具與制菌工具消毒是非常方便，有效的傳統(tǒng)的消毒方法是用甲醛，硫磺等化學(xué)試劑熏蒸，眾所周知，甲醛，硫磺熏蒸的弊病較多，國(guó)外近期研究證明，在控制空氣微生物方面，臭氧是甲醛和其它化學(xué)熏劑的替代物。通過化學(xué)霧化，紫外線與臭氧作消毒劑的對(duì)照試驗(yàn)，結(jié)論是臭氧既有效又無(wú)殘留，臭氧“大大抑制” 食用菌培養(yǎng)室，接菌室與制菌工具中各種細(xì)菌群體的生長(zhǎng)。
其方法是；

（1）將臭氧發(fā)生器直接放在食用菌培養(yǎng)室，接菌室入門口上方或放在離地面2m-2.5m的地方加以固定，對(duì)潔凈區(qū)進(jìn)行消毒滅菌

（2）大的食用菌廠可以將臭氧發(fā)生器放在食用菌培養(yǎng)室，接菌室的外面，通過管道將臭氧打入各輸入口中，然后被送入各潔凈區(qū)，或采用臺(tái)式自帶風(fēng)機(jī)臭氧發(fā)生器，多點(diǎn)設(shè)計(jì)將臭氧散布在潔凈區(qū)內(nèi)，統(tǒng)稱為外置式臭氧發(fā)生器，外置式臭氧發(fā)生器安裝檢修方便。

（3）采用臭氧發(fā)生器連接導(dǎo)氣管和曝氣系統(tǒng)，在食用菌培養(yǎng)室，接菌室，黑木耳深加工廠頂部布設(shè)曝氣管網(wǎng)，將臭氧送入潔凈區(qū)。特別是在食用菌生產(chǎn)前把各菌房用臭氧提前殺菌消毒。幾種方法消毒效果都是一樣的。從使用臭氧進(jìn)行滅菌的食用菌廠的檢測(cè)報(bào)告可看到，菌檢全部合格，完全替代了令人頭痛的甲醛，硫磺熏蒸大消毒同時(shí)，能耗減少，人身健康，取得了滿意效果。

二，空間的消毒滅菌
（1） 食用菌培養(yǎng)室，接菌室，操作室，工作室，催芽棚，木耳，蘑菇、香菇、平菇載培大棚，黑木耳，蘑菇深加工車間包裝車間。利用臭氧消毒殺菌效果極佳。同時(shí)可去除各類雜菌和異味污染，保證商檢出口質(zhì)量。按照衛(wèi)生部消毒技術(shù)規(guī)范要求，對(duì)空間消毒的臭氧濃度是10ppm,即20mg/m3濃度的臭氧，作用40min,對(duì)自然菌殺滅率達(dá)到98%以上。

一般（0.5—1.0×10-6臭氧即可達(dá)到90%以上的空氣殺菌率。在150m3的培養(yǎng)室內(nèi)，臭氧消毒2h（臭氧濃度4×10-6=左右=0.000004）前后對(duì)照數(shù)據(jù)；
空氣中細(xì)菌總數(shù)（個(gè)/m3）         消毒前/消毒后
食用菌培養(yǎng)室                     1325 / 00
接    菌  室                     1208 / 00
催 芽 大 棚                      2360 /26
深加工包裝間                     1587 / 00 
（2）物體的表面消毒滅菌 在食用菌生產(chǎn)過程中，常常要對(duì)原材料，工具器材，包裝物，生產(chǎn)場(chǎng)所等進(jìn)行體表面消毒。特別是要對(duì)調(diào)好的培養(yǎng)基在臭氧消毒下進(jìn)行多次翻動(dòng)攤開消毒。在高壓滅菌時(shí)效果更好，高壓滅菌后的菌代口極易感染雜菌這時(shí)做表面殺菌非常重要。傳統(tǒng)的方法是用紫外線消毒，但消毒不徹底，存在消毒死角，衰減快，對(duì)于特定環(huán)境中的某些細(xì)菌無(wú)法殺死等種種弊端。按照衛(wèi)生部消毒技術(shù)規(guī)范                                   要求，用臭氧氣體對(duì)物體表面上污染的微生物的殺滅，一般要求30ppm,即60mg/m3，相對(duì)濕度≥70%，作用60min-120min可達(dá)到消毒效果。

使用臭氧產(chǎn)品的注意事項(xiàng)

1.無(wú)論使用何種臭氧凈化設(shè)備進(jìn)行接種，都應(yīng)設(shè)立隔離間。

2.工作間內(nèi)無(wú)灰塵，地面要保濕。

3.因臭氧分解速度快，強(qiáng)制消毒后進(jìn)入工作狀態(tài)時(shí)應(yīng)間歇消毒。

4.養(yǎng)菌棚室，出菇棚室每天應(yīng)定點(diǎn)、定時(shí)加入臭氧。

臭氧是一種符合食用菌行業(yè)特點(diǎn)的理想消毒劑，應(yīng)用臭氧氣體對(duì)接種室進(jìn)行空氣消毒，在非潔凈室空間內(nèi)可達(dá)到萬(wàn)級(jí)、百級(jí)空間潔凈等級(jí)，

接種室臭氧空氣消毒設(shè)備采用外置式，可以延長(zhǎng)設(shè)備使用的壽命，使操作更加安全方便。

為了保證臭氧發(fā)生器制取臭氧的濃度和穩(wěn)定性，應(yīng)盡量用高濃度純氧為氣源。通過控制設(shè)備的開啟時(shí)間和關(guān)閉時(shí)間來(lái)控制臭氧投加劑量令操作安全方便。同時(shí)投加的臭氧劑量要高于理論閾值濃度計(jì)算出的投加劑量數(shù)倍，才能在不加除塵加濕的一般條件下獲得滿意的效果

（凈化室、培養(yǎng)室按氧氣源），（大棚按空氣源

（接種室，最好按氧氣源配）

潔凈室十萬(wàn)級(jí)，一般我會(huì)加大一點(diǎn)。算出來(lái)X2。主要看房間多大。

接種室百級(jí)(用氧氣源。  但是有些客戶會(huì)用空氣源，輔助農(nóng)藥消毒

大棚按照十萬(wàn)級(jí)相應(yīng)配大一點(diǎn)20左右

培養(yǎng)室按照十萬(wàn)級(jí)。機(jī)器不可以長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行產(chǎn)生臭氧機(jī)，要叫客戶觀察

還有就是接種的前一個(gè)工序，強(qiáng)冷。強(qiáng)冷室消毒也很多客戶做。

臭氧投加方法

空調(diào)吹送法：適用于大型空間或同時(shí)多個(gè)空間消毒

利用 HVAC 系統(tǒng)中凈化風(fēng)機(jī)產(chǎn)生的壓力風(fēng)源，擴(kuò)散至所控制的整個(gè)潔凈

區(qū)域，此安裝方法對(duì)新建、改建廠房均適用。

如圖示：

管道噴淋法：適用于中大型空間或同時(shí)多個(gè)空間消毒

采用臭氧發(fā)生器連接導(dǎo)氣管，在食用菌培養(yǎng)室，接菌室，黑木耳深加工廠頂部布設(shè)管道，將臭氧送入潔凈區(qū)。特別是在食用菌生產(chǎn)前把各菌房用臭氧提前殺菌消毒。

 臭氧投加方法

直接吹送法，適用于小型消毒空間

將機(jī)器安裝在消毒間外通風(fēng)干燥的地方

連接臭氧輸出管，管道出口置于車間離房頂20-25cm的 地方，使臭氧更好的融入消毒空間

接通電源，調(diào)節(jié)定時(shí)器，機(jī)器會(huì)在工作完成后自動(dòng)關(guān)機(jī)

也可使用通過臭氧水定期為工作器具等進(jìn)行清洗，從而達(dá)到一個(gè)更潔凈的工作環(huán)境

20g以上為風(fēng)冷+水冷型臭氧機(jī)，需外接冷卻水，機(jī)器開機(jī)使用時(shí)打開冷卻水開關(guān)。

食用菌培養(yǎng)室，接菌室，操作室，工作室，催芽棚，木耳，蘑菇、香菇、平菇載培大棚，黑木耳，蘑菇深加工車間包裝車間。利用臭氧消毒殺菌效果極佳。同時(shí)可去除各類雜菌和異味污染，保證商檢出口質(zhì)量。

每種食用菌都對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境有特定要求，溫度、光照、濕度、氧氣、二氧化碳含量等環(huán)境因子對(duì)食用菌的生長(zhǎng)尤為重要，在不同地域，不同季節(jié)需要采取不同的環(huán)境控制技術(shù)，選擇合適的菌種，并進(jìn)行科學(xué)的栽培，才能生產(chǎn)出高產(chǎn)，優(yōu)質(zhì)的食用菌。

1：食用菌車間的溫度

    食用菌的溫度主要分三個(gè)階段：菌絲體階段、子實(shí)體分化和子實(shí)體生長(zhǎng)。通俗講，就是發(fā)菌、出菇和長(zhǎng)菇三個(gè)階段。發(fā)菌的適宜溫度一般在20°~26°，出菇一般低溫型菌控制在15°左右，長(zhǎng)菇一般根據(jù)市場(chǎng)的需求來(lái)控制，例如，白色金針菇控制在8°左右，而猴頭菇控制在15°~18° 。長(zhǎng)菇期間，濕度控制在80%~95% 。
工廠化栽培的培養(yǎng)室、催蕾室、出菇室空間在70~90平米。多采用層架式立體栽培，采用的制冷機(jī)多用5~7.5匹，空間越大，所用的制冷設(shè)備功率越大。工廠化栽培時(shí)濕度多采用超聲波加濕器或簡(jiǎn)易的加濕設(shè)備。

2：食用菌生長(zhǎng)時(shí)間

一般菌類下種后40天即可開始采收，3～4個(gè)月便完成一個(gè)周期。

食用菌生產(chǎn)流程：       

備料 →預(yù)處理→ 原料配比攪拌→ 裝袋 →滅菌 →強(qiáng)冷→ 接種→培養(yǎng)→ 出菇管理 →采收包裝

車間消毒方式：

紫外線消毒

2.甲醛和高錳酸鉀熏蒸法

3.動(dòng)態(tài)空氣消毒 （食品動(dòng)態(tài)消毒機(jī)的造價(jià)高于紫外線、臭氧，且只能用于空氣消毒，對(duì)物體的表面微生物沒有滅殺作用，也不可用于水消毒。將紫外線殺菌、臭氧殺菌、食品動(dòng)態(tài)消毒機(jī)配套起來(lái)使用）

4.臭氧

紫外線和臭氧

都屬于靜態(tài)消毒 ，讓細(xì)菌的DNA鏈斷裂，造成核酸和蛋白的交聯(lián)破裂，和臭氧一樣，都是破壞DNA達(dá)到滅菌的效果。紫外線穿透能力弱，要經(jīng)常用酒精擦拭燈管，車間應(yīng)該清潔干燥少塵埃和水霧，紫外線燈管壽命不超過1000小時(shí)，紫外線對(duì)人體皮膚眼睛有危害，臭氧對(duì)呼吸道有危害，都不能在有人的情況下使用。

臭氧最好用氧氣源，濃度高，效果和，離開的時(shí)候開機(jī)，消毒完半小時(shí)至2小時(shí)后入場(chǎng)。

微生物的培養(yǎng)方法有三種，即純培養(yǎng)法、選擇性培養(yǎng)法和優(yōu)勢(shì)培養(yǎng)法。

菌種制作的基本設(shè)備

食用菌菌種制作的工藝流程 培養(yǎng)料的貯備和預(yù)處理------- 容器、工具的洗滌------ 配料、培養(yǎng)基制作------ 滅菌------ 冷卻------ 接種------ 培養(yǎng)------- 貯存

基本設(shè)施 ① 廠房：② 原料庫(kù)③原料預(yù)處理場(chǎng)地④ 洗滌室 ⑤配料室 ⑥ 滅菌室 ⑦ 接種室 ⑧ 化驗(yàn)室 ⑨ 培養(yǎng)室 ⑩貯存室

純種分離

菌種的分離方法主要有：孢子分離法、組織分離法、基內(nèi)菌絲分離法和土中菌絲分離法。

孢子分離法：屬有性繁殖。對(duì)于香菇、平菇異宗結(jié)合的菇類，為避免產(chǎn)生單孢不孕現(xiàn)象，必須采用多孢分離法。單孢分離法主要用于雜交育種的研究。

（1）種菇的選擇和處理

種菇選擇的標(biāo)準(zhǔn)：必須純正，具有本菌株性狀，發(fā)育健壯，無(wú)病蟲害，成熟度適當(dāng)。種菇選定后，首先除去附著在菇體表面的雜物，如蘑菇、草菇可用0.1%升汞浸泡消毒2-3分鐘，然后用無(wú)菌水漂洗3次，以洗除表面附著的藥物，最后用無(wú)菌紗布吸干水分。香菇、平菇可用75%酒精進(jìn)行表面消毒。

多孢分離法

① 整菇播種法② 鉤懸法 ③ 貼附法 ④菌褶上抹取孢子法⑤ 孢子印分離法 ⑥ 空中孢子捕捉法

單孢子分離法

一般采用方法：平板稀釋法、連續(xù)稀釋法、毛細(xì)管法等。

組織分離法 ：（1） 子實(shí)體分離法（2）菌核分離法（3）菌索分離法：對(duì)一些不易找到子實(shí)體及菌核的菌類

基內(nèi)菌絲分離法： 對(duì)于子實(shí)體只有在特定的季節(jié)下出現(xiàn)，平時(shí)不易采到，或子實(shí)體小而薄或呈膠質(zhì)狀態(tài)。（1）菇木（或耳木）分離法： 在食用菌繁殖旺盛期 （2） 代料基質(zhì)分離法： 分離前，選擇一批子實(shí)體發(fā)生早、產(chǎn)量高、菇體尚幼嫩且生活力強(qiáng)而無(wú)病蟲害的栽培袋，待子實(shí)體將近成熟時(shí)，去掉子實(shí)體，然后用75%酒精將培養(yǎng)袋進(jìn)行消毒后，在培養(yǎng)料下1.5cm處挑取0.3cm的培養(yǎng)料小方塊組織，接入試管培養(yǎng)基的中央，置于恒溫下培養(yǎng)。

土中菌絲分離法： 用于采集生長(zhǎng)在土中的菇類菌絲體

制種技術(shù)

采用孢子分離、組織分離和基內(nèi)菌絲分離等方法分離培養(yǎng)而獲得的純菌絲，經(jīng)過原種的擴(kuò)大培養(yǎng)和母種、栽培種的制作，即可作為食用菌生產(chǎn)用的菌種。

菌種的類型

母種、原種、生產(chǎn)種

培養(yǎng)基的種類

天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基

原種制作

從擔(dān)孢子或菇體組織直接分離培養(yǎng)獲得的原種或引進(jìn)的原種

母種及生產(chǎn)種制作

將原種菌絲體移植到由糞、草、木屑、棉籽殼或麥粒等原料配制成的培養(yǎng)基上，而制成的菌種稱母種。將母種再擴(kuò)大繁殖制成的菌種，稱栽培種或生產(chǎn)種。

培養(yǎng)基滅菌

高壓蒸汽滅菌法 瓊脂培養(yǎng)基采用1.05kg/cm2 壓力，溫度121℃ ，滅菌45-60分鐘；母種和栽培種固體培養(yǎng)基采用1.2-1.5kg/cm2 壓力，溫度123-129℃ ，滅菌1-1.5 小時(shí)。

常壓蒸汽滅菌

接種室消毒滅菌

熏蒸消毒法：甲醛與高錳酸鉀混合熏蒸法

紫外線消毒

石碳酸滅菌

臭氧消毒

接種

在無(wú)菌條件下，將原種或母種菌種移接到經(jīng)過嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基上，稱為接種。

菌種培養(yǎng)

原種培養(yǎng)

接種后的試管原種，置于25℃左右的恒溫箱中培養(yǎng)，經(jīng)過2-3天即可檢查生長(zhǎng)情況，純潔菌種經(jīng)過7-15天的培養(yǎng)，原種菌絲即可長(zhǎng)滿斜面培養(yǎng)基。

母種及栽培種培養(yǎng) 栽培種接種后置于25℃左右的培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)。當(dāng)菌種瓶中菌絲體伸入培養(yǎng)基的1/3時(shí)，培養(yǎng)室內(nèi)的溫度可降低2-3℃，以避免菌絲生長(zhǎng)代謝加強(qiáng)，料溫上升而引起高溫障礙。培養(yǎng)室內(nèi)保持60-70%的空氣相對(duì)濕度。一般經(jīng)過20-40天的培養(yǎng)，菌絲即可擴(kuò)散生長(zhǎng)到整個(gè)培養(yǎng)基，再經(jīng)過7-10天即可培養(yǎng)出優(yōu)質(zhì)的菌種。

菌種保藏方法及復(fù)壯技術(shù)

菌種保藏方法

菌種保藏的基本手段是采用低溫、冷凍、干燥、減少供氧量等方法，終止其繁殖，降低其代謝強(qiáng)度，使之處于休眠狀態(tài)。

斜面低溫保藏法：保藏時(shí)間不長(zhǎng)。

液體石蠟保藏法：保藏期限可達(dá)3-5年。

濾紙保藏法：保藏期限可達(dá)2-5年。

真空冷凍干燥保藏法：保存時(shí)間可達(dá)數(shù)年

液態(tài)氮超低溫保藏法：近年國(guó)際流行的新技術(shù)。

菌種復(fù)壯技術(shù)

提純復(fù)壯。主要有組織分離法及菌絲體復(fù)壯的方法。